论文关键词：冬虫夏草；二级接种；人工培养；接种瓶

　　论文摘要：冬虫夏草（Cordyceps sinensis sacc）具有很大的经济价值，但目前天然冬虫夏草逐渐减少。现在人们开始了人工培养冬虫夏草。在实验中冬虫夏草二级接种是人工培养冬虫夏草的关键。冬虫夏草二级接种是指由一级种接到接种瓶内。二级种更有利于冬虫夏草子实体的长出。接种前需要配制培养基和灭菌。接种时动作要快且准降低污染率。接种后，放在黑暗室温下培养，观察结果，分析原因，探索更好的方法，从而更利于冬虫夏草子实体的长出。
　　
　　
　　冬虫夏草，冬天是虫，夏天是草，冬虫夏草简称虫草，是冬季真菌寄生于虫草蛾幼虫体内，到了夏季发育而成。冬虫夏草主要分布在青海，西藏，四川，云南，贵州，甘肃海拔4000米左右的高海拔地区，而且含量非常少。冬虫夏草虫体呈金黄色，淡黄色或黄棕色，药用价值高功效好。在国内外被视为珍品，市场需求量大，但因其天然资源量稀少，故价格十分贵。
　　冬虫夏草可以降低血液中的胆固醇和甘油三酯，提高对人体有利的高密度脂蛋白，减轻动脉粥样硬化。
　　除次之外，冬虫夏草还具有直接抗病毒、调节中枢神经系统功能、调节性功能等作用。冬虫夏草能对人体起到如此全面的保健作用，可谓神奇之极，也无愧自古以来“仙草”的美称。在现代社会，服用冬虫夏草已不仅仅是本身身体健康的保证，更重要的是由此带来的极致健康生活品质。
　　
　　1 材料和方法
　　
　　1.1 材料
　　在做二级接种实验时所用的材料：冬虫夏草(Cordyceps sinensis sacc)一级种是由2005年5月从西藏采来的冬虫夏草子实体经无菌分离培养所得。根据多次试验培养基成分结论如下：葡萄糖10g、磷酸氢二钾1g、蛋白胨7g、维生素B2两片、七水硫酸镁0.3g、水1000ml、650ml大米。
　　1.2 方法
　　药品的称量：对于一克以下的用精确的天平称量。在称量过程中，先调节天平所在的平面平衡以及天平平衡，并在左盘中放张滤纸后也要平衡。然后，制定规格，用药匙向左盘中放入所要称取得药品直到平衡。但要注意先把天平放下来，再取盘中的药品。
　　大于等于一克的物品用托盘天平量取即可。首先调节托盘天平平衡，在这一过程中，要注意先把游码调到零点，调平后按左物右码的规则。移动游码直到所需的规格，然后，用药匙向左盘中放药品直到平衡，则左盘中的药品即为所称量的。
　　用量筒量取1000ml的水和650ml的大米。
　　在进行二级种培养基制作过程中，我们运用了一个方案
　　 将量好的葡萄糖、磷酸氢二钾、蛋白胨，维生素B2、七水硫酸镁，同时溶解在1000ml水中，用玻璃棒搅拌使溶质完全溶解。设总体积为v，称取0.65v大米约650ml的大米，并用自来水冲洗一遍。把冲洗干净的大米和所配制的溶液放入蒸压锅内，蒸成熟米饭，然后冷直室温，再平均装到十个接种瓶（本试验用的是白色耐高温高压的罐头瓶）内。在装的过程中必须使米饭疏松平齐，然后用细绳和单层塑料袋扎上瓶口。完成后再灭菌。
　　灭菌过程如下：把接种瓶放到灭菌筐中，在灭菌筐放进高压灭菌锅前先检查高压灭菌锅内是否有足够的水，检查标准是看锅底部中央有一个圆孔，当水面高于或等于圆孔面时就可以。再打开电源，然后按设置按钮，通过上下键来调节温度、时间，即125摄氏度、30分钟。最后按液相按钮。此时也可以设定一个保温温度。灭菌后切断电源，通过红外感应打开盖[开盖时身体侧向一旁，因为开盖会有大量热气冒出以免烫伤]小心地把接种瓶摆放在桌面上冷直二十四小时。
　　二级接种是指将试管[一级]内的冬虫夏草菌丝接到空间相对较大的接种瓶内，从而有利于冬虫夏草子实体的长出。