4.3 回收实验

   精密取TTB原料9份（40mg、50mg、60mg各3份），按处方规定加空白辅料，配成供试品溶液，另取同批TTB原料适量，配成对照溶液，分别取0.020ml注入液相色谱仪，记录色谱图，用外标法计算回收率，见表7。

　　4.4线性实验

   精密称取20mgTTB原料药，分别用磷酸盐缓冲液（PH7.0）配成不同浓度的供试品溶液，分别取0.020ml注入液相色谱仪，记录色谱图，结果见表8。

　　4.5方法的精密度

   取TTB原料20mg，置100ml容量瓶中，按处方规定加入空白辅料，配成供试品溶液；另取同批TTB原料适量配成0.120 mg/ml的对照液，分别取0.020ml，连续进样6针，结果见表9。

　　4.6稳定性实验

   取本品细粉，加磷酸盐缓冲液（PH7.0）使溶液并定时稀释成0.020g/ml，于0、1、2、4、6小时分别注入液相色谱仪，见表10，记录峰面积，计算RSD值。

　　4.7HPLC法测定含量

   供试品溶液的制备与测定：取本品10片，精密称定，研细，精密称取TTB适量（约相当于TTB200mg）置100ml量瓶中，加磷酸盐溶液缓冲液（PH7.0）60 ml，振摇使TTB溶解（必要时超声处理使溶解完全），再加磷酸盐缓冲液（PH7.0）稀释至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液10ml，置100ml容量瓶中加磷酸盐缓冲液（PH7.0）稀释至刻度，摇匀，取0.020ml注入液相色谱仪；记录色谱图。

   对照品溶液的制备与测定：精密称定TTB原料药20mg，置100ml容量瓶中，加磷酸盐缓冲液（PH7.0）稀释成每毫升中约含TTB0.020mg的溶液（必要时超声处理使溶解完全），同上测定。

   含量测定方法：按外标法以峰面积计算出供试品中TTB的含量。结果见表11。      

　　1.结果与讨论

   1.鉴别

表1 TTB口含片紫外分光光度法鉴别

波长

280

282

284

286

288

290

292

294

296

298

吸光度

0.385

0.402

0.407

0.412

0.414

0.412

0.404

0.390

0.372

0.357

　　2.溶出度方法试验

　　2.1溶剂的选择

表2溶剂的溶出度测定

溶出介质

磷酸缓冲液

0.1mol/L盐酸溶液

水

30min

81.98%

68.32%

29.71%

45min

94.69%

92.80%

35.38%

   从结果来看,采用磷酸盐缓冲液(PH6.5)1000ml为溶剂，在规定的时间内能达到很好的溶出，以0.1mol/L盐酸溶液1000ml为溶剂，溶出度亦能达到药典要求，但较磷酸盐缓冲液稍低，且该法不易定容，故不于采用。以水为溶剂，结果很不理想，不予采纳。从而采用部颁标准规定以磷酸盐缓冲液(PH6.5)为溶出溶剂。

　　2.2转速的确定

表3 不同转速的溶出度比较

转速

75转/分

100转/分

120转/分

30min

52.91%

89.19%

93.71%

45min

74.47%

107.18%

108.61%

   结论：从上表来看，转速越快，则溶出度越高，但在转速高于100转/分后，影响不明显，从保护仪器的角度考虑，故将转速定为100转/分。