3.4 移植的时间
　　动物研究从脑梗死模型建立后1天到1月移植均有，有关不同移植时间对神经的增生、细胞分化、整合及神经功能恢复的影响的研究还较少。急性期时兴奋毒性神经基质、自由基等的释放对新生组织造成损害。考虑到脑梗死的自然恢复过程，有些学者在脑梗死后数月进行移植，疤痕组织的形成可能会影响移植物的生长。
　　3.5 MSCs可参与正常的基质代谢，修复细胞外基质，促进神经元细胞的增殖、分化和迁移，参与中枢神经系统损伤的修复。
　　由于严重缺血或细胞因子的刺激，基质祖细胞可以沿内皮祖细胞伸展并聚集，因而有助于血管新生和(或)损伤愈合，Chen等发现，MSCs移植后14d，BrdU标记的MSCs可能与内皮祖细胞一样发挥作用，促进缺血组织的血管再生和损伤神经组织的修复。
　　3.6 移植的细胞数
　　既往研究脑局部注射移植的细胞总数为2.25×10?5(分为3个点注射)，静脉或动脉注射移植的细胞数为2～6×10?6时，神经功能缺失症状均有恢复[8]，而静脉移植的细胞数为1×10?6时，神经功能恢复不明显。MSCs浓度太低，达不到治疗效果，浓度太高易致静脉栓塞。
　　3.7 移植后的表达率
　　对供体来源的MSCs用BrdU标记，双染后免疫荧光显微镜或共聚焦显微镜下计算BrdU和NeuN或GFAP均为阳性的细胞以判断移植后的表达情况。表达率与移植的方式有关[5]，有报道一些神经营养因子可以提高诱导分化后的表达率，在脑源性神经营养因子(BDNF)、神经生长因子(NGF)及碱性纤维母细胞生长因子(bFGF)存在的情况下，NeuN的表达率达到2%，GFAP达8%。
　　3.8 MSCs治疗脑梗塞
　　研究表明部分MSCs可通过正常的血脑屏障迁移到脑内广泛的区域，局灶性脑缺血时，由于血脑屏障的破坏，可能有助于MSCs选择性迁入缺血脑区，此外，缺血脑组织的炎症等缺血相关信号也可能诱导和促进MSCs的迁移，由于脑缺血后局部微血管表达的粘附因子的引导，经静脉或颈内动脉输入体内的MSCs可以分化为类似神经元、星形胶质细胞和小胶质细胞的细胞，这些细胞主要分布在缺血区，显然脑内的特有微环境，尤其是缺血损伤信号诱导了MSCs的迁移、分化，缺血微环境似乎有利于MSCs的存活、增殖，脑缺血可以诱导脑内尤其是缺血周边区内胶质细胞系源性神经营养因子(glialcellline derived neurotrophic factor，GDNF)、神经生长因子(nerve growth factor，NGF)、碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor，bFGF)、转化生长因子1(transforming growth factor 1，TGF1)等神经营养因子的表达，MCAO后，BrdU阳性的MSCs高度集中在缺血周边区，该区表达的神经营养因子可能对随后移植的MSCs的存活、分化或迁移有重要作用[10]。
　　4 展望
　　
　　MSCs的移植，尤其是自体MSCs移植克服了诸如伦理免疫排斥等问题，信捷职称论文写作发表网，因此有更好的应用前景，MSCs极易在脑内存活、分化及整合，移植后并不产生炎症和免疫排斥反应，所以MSCs移植治疗局灶性脑缺血是切实可行的，但是下列问题需要进一步解决：(1)经静脉或颈动脉注射的MSCs迁移入脑内的机制，以提高MSCs进入脑内的数量；(2)MSCs在脑内迁移、分化和存活的机制及影响因素；(3)MSCs在脑内分化的神经元、胶质细胞能否取代已死亡的神经元和胶质细胞，分化的神经元能否与宿主神经元形成功能性突触联系和神经环路，它们在脑缺血损伤恢复中的地位；(4)MSCs在脑内可否产生有关神经营养因子、细胞因子及细胞外基质并参与神经功能重建；(5)将携带有关神经营养因子或细胞因子基因的载体转染MSCs，使其在缺血脑内表达神经营养因子等，从而达到治疗局灶性脑缺血的目的；(6)高效诱导MSCs体外分化的最佳方法及分化的神经元的移植对局灶性脑缺血的作用；(7)MSCs和基因治疗 骨髓基质细胞移植入脑几天内发生凋亡，那么如何提高其存活率将成为一个主要问题。Bcl-2基因是细胞凋亡的重要抑制基因，近年发现它在脑缺血中表达并在其中起重要作用，Shimizu等研究发现，缺血诱发的bcl-2蛋白可增强脑对后继缺血的耐受性，具有神经保护作用，减少缺血神经细胞凋亡。因此可尝试利用Bcl-2基因抗骨髓基质细胞凋亡观察是否增强MSCs治疗脑梗死的效果。
　　
　　参考文献
　　[1] Woodbury Dl. Adult rat and human bone Marrow stromal cells differentiate into Neurons. Neuro sci Res，2000，61：364-370
　　[2] Colter DC. Identification of asub population of rapidly self renewing adult potential adult stem cells in colonies of human marrow stromal cells. Proc Natl Acad Sci U S A，2001，98：7841-7845
　　[3] Prockop DJ. Marrow stromal cells for nonhematoietic tissues. science，1997，276：71-74
　　[4] Gao J，Dennis JE，Muzic RF，et al. The dynamic invivo distribution of bone marrow derived mesenchymal stem cells after infusion. Cells Tissues Organs，2001，169：12-20
　　[5] Sanchez Ramos J，Song S，Cardozo Pelaez F，et al. Adult bone marrow stromal cells diffrentiate into neural cells invitro. Exp Neurol，2000，164：247-256
　　[6] Brazelton TR，Rossi FMV，Keshet GI，et al. From marrow to brain：expression of neuronal phynotapes in adult mice【J】.science，2000，290：1775-1779
　　[7] LiY，Chen J，Wang L，et al. Treatment of stroke in rat with Intracarotid administration of marrow stromal cells【J】.Neurology，2001，56：1666-1672
　　[8] zhao LR，Duan WM，Reyes M，et al. Human bone marrow stem cells exhibit neural phenotypes and ameliorate neurological deficits after grafting into the ischemic brain of rats【J】.Exp Neurol，2002，74(1)：11-20
　　[9] Wang L，Li Y，Lu D，et al. Neuro strophins promote bone marrow stromal cells(MSCs) to express neural proteins invitro【J】.Stroke，2001，32：334-339
　　[10] BarbashI M，Chouraqui P，Baron J. Systemic delivery of bone Marrow -derived mesenchymal stem cells to the infracted myocardium：feasibity，cell migration，and body distribution【J】. Circulation，2003，108(70)：863-868