2结果
2.1PNS对吗啡戒断大鼠海马组织总CREB的影响实验结果表明：大鼠在慢性给予吗啡处理、纳络酮催促戒断及给予不同剂量PNS后海马组织总CREB的表达在各组之间有所不同，但与对照组相比均无显著性差异（P>0.05，表1，图1A）.
2.2PNS对吗啡戒断大鼠海马组织磷酸化CREB蛋白表达的影响慢性MOR组海马组织pCREB蛋白表达较对照组略有升高，但无统计学差异（P>0.05）. NAL组海马组织pCREB蛋白表达显著高于对照组和MOR组(P<0.01)，在给予吗啡的同时每kg体质量分别给予50，100，200，400 mg PNS之后可以显著降低海马组织的pCREB蛋白表达，并呈剂量依赖性，以400 mg/kg剂量组磷酸化水平降低最为显著（P<0.01，图1B，表1）.
表1PNS对吗啡戒断大鼠海马CREB、pCREB表达以及CREB/DNA结合活性的影响(略)
aP<0.05, bP<0.01 vs对照组； fP<0.01 vs MOR； dP<0.01 vs NAL.对照：盐水处理组；MOR：单独给予吗啡处理组；NAL：纳洛酮催促戒断组；PNS50：PNS50 mg/kg治疗组；PNS100：PNS100 mg/kg治疗组；PNS200：PNS200 mg/kg治疗组；PNS400：PNS400 mg/kg治疗组；CREB：cAMP反应元件结合蛋白；pCREB：磷酸化CREB.
1：盐水处理组；2：单独吗啡处理组；3：纳洛酮催促戒断组；4：PNS 50 mg/kg治疗组；5：PNS 100 mg/kg治疗组；6：PNS 200 mg/kg治疗组；7：PNS 400 mg/kg治疗组.
图1Western blot检测PNS对吗啡戒断大鼠海马组织总CREBp(A)和CREB(B)的影响(略)
2.3PNS对吗啡戒断大鼠海马组织CREB/DNA结合活性的影响实验结果显示：吗啡依赖大鼠海马组织CREB/DNA结合活性与对照组相比无显著差异(P>0.05). 纳络酮催促戒断则使大鼠海马CREB/DNA结合活性显著高于对照组和MOR组(P<0.01，表1).
3讨论
慢性吗啡引起神经元可塑性和适应性改变的基础是转录因子调节某些靶蛋白表达，机体稳态重建的结果［2］. 转录因子CREB是脑内介导多个信号通路调节基因转录的主要核因子，其在脑组织内含量丰富，尤以神经元内居多［3］. CREB是首先发现的与药物成瘾密切相关的转录因子，其表达和功能是目前医学界研究的热点之一［4］.
慢性吗啡诱导的依赖、纳络酮诱导的戒断动物的中枢神经系统内以及某些细胞株的CREB磷酸化程度明显升高以及CREB/CRE结合活性增强，且其变化具有区域特异性，是衡量神经细胞活动程度的重要生化指标［5-6］. 而海马作为边缘结构则广泛地参与了学习与记忆过程，是参与成瘾记忆形成和强化的重要脑区［7-8］，因此本实验选取海马作为实验脑区. 结果证实，慢性给予吗啡、纳络酮催促戒断及不同剂量PNS各组CREB蛋白表达水平在海马组织有所不同，但与对照组相比均无显著性差异（P>0.05），吗啡依赖大鼠海马组织中CREB磷酸化水平及CREB/DNA结合活性有增高趋势，但无统计学意义，而纳络酮催促戒断大鼠海马组织中CREB磷酸化水平及CREB/DNA结合活性则明显的高于对照组和吗啡依赖组大鼠.
我们研究从蛋白水平和转录水平研究了PNS对吗啡依赖大鼠纳络酮催促戒断诱导的脑内转录因子CREB的影响，探讨了三七总皂甙缓解吗啡戒断症状的部分分子机制，研究结果为PNS的临床应用提供了必要理论依据.
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