反义核酸技术及其在寄生虫学中的应用进展(3)
作者:佚名; 更新时间:2014-12-13
序。有趣的是,尽管它们的酶活性均受到CsA抑制,但用CsA预处理后的利什曼原虫对巨噬细胞感染率并未降低,由此看来CsA不能与利什曼原虫自身cyclophilin结合。为此,作者利用反义核酸技术和动物模型,首先合成针对鼠宿主巨噬细胞cyclophilin的AON,并在感染虫体前加入到巨噬细胞培养基中,结果巨噬细胞cyclophilin的表达和细胞内无鞭毛体的增殖均受到明显抑制,充分证明宿主细胞cyclophilin在虫体的细胞内增殖机制中发挥重要作用,首次阐明宿主细胞cyclophilin对细胞内利什曼原虫存活具有重要意义。

  3.4 其它原虫

  Ankri等利用反义RNA抑制溶组织内阿米巴(entamoeba histolytica)半胱氨酸蛋白酶基因表达[44],结果筛选并获得一稳定转化虫株,其半胱氨酸蛋白酶活性90%被抑制。该转化虫株在Diamond培养基中生长速率正常,致细胞病变效应和溶组织活性与对照组转化虫株相同,但其吞噬作用则明显被抑制。

  4 展 望

  反义核酸在寄生虫学领域中应用还刚刚起步,不可避免地碰地许多有待解决的问题:1)目前的实验结果仅限于体外实验,多数处于体外培养水平,动物模型和体内的作用尚不得而知;2)现有研究多为AON,毕竟依赖人工合成,开展反义表达载体和ribozyme于抗寄生虫研究甚为必要;3)定向打靶问题。反义核酸如能专一地定向进入靶细胞发挥作用,必将提高其作用效果,开展诸如受体介导的定向转移技术研究势在必行。总之,由于反义核酯具有许多其它药物不可比拟的特性,它在寄生虫学中的应用前景不可估量,特别是对于提示寄生虫学中某些长期悬而未决的机制具有很大潜力。随着研究的不断深入,当人们成功地驾驭这种技术时,必将造福广大人类。

参考文献

  1 Izant JG & Weintraub HM.Cell,1984;36(4):1007-1015

  2 Coleman J et al.Cell,1984;37(2):429-436

  3 Weintraub HM.Sci Am,1990;262(1):39-46

  4 Krol ARV.Gene,1988;72(1-2):45-50

  5 Shibahara S et al.Nucleic Acids Res,1989;17(1):239-252

  6 Szcylik C et al.Science,1991;253(5019):562-565

  7 Watson DH et al.Cancer Res,1991;51(15):3996-4000

  8 Zerial A et al.Nucleic Acids Res,1987;15(23):9909-9919

  9 Agrawal S et al.Proc Natl Acad Sci uSA,1988;85(19):7079-7083

  10 Wagner RW.Nature,1994;372(6504):333-335

  11 Flanagan WM et al.Nucleic Acids Res,1996;24(15):2936-2941

  12 Cech TR,Gene,1988;73(2):259-271

  13 Forster AC & Symons RH.Cell,1987;49(2):211-220

  14 Sherman IW.Microbiol Rev,1979;43(3):453-459

  15 Ferone R.Mol Pharmacol,1969;5(1):49-59

  16 Pouvelle B et al.Nature,1991;353(6339):73-75

  17 Rapaport E et al.Proc Natl Acad Sci USA,1992;89(18):8577-8580

  18 Sartorius C & Franklin RM,Nucleic Acids res,1991;19(7):1613-1618

  19 Ramasamy R et al.Biochem Biophys Res commun,1996;218(3):930-933

  20 Clark DL et al.Mol Biochem Parasitol,1994;63(1):129-124

  21 Kanagartnam R et al.Int J biochem Cell biol,1998;30(9):979-985

  22 Barker RH et al.Exp Parasitol,1998;88(1):51-59

  23 Barker RH et al.Proc Natl Acad Sci USA.1996;93(1):514-518

  24 Goldberg DE.Semin Cell biol,1993;4(5):355-361

  25 Sullivan DJ et al.Proc Natl Acad Sci uSA,1996;93(21):11865-11870

  26 Sullivna DJ et al.Science,1996;271(5246):219-222

  27 Wellems TE & Howard RJ.Proc Natl Acad Sci uSA,1986;83(16):6065-6069

  28 Sullivan DJ et al.Mol Biochem Parasitol,1996;83(2):247-251

  29 Brost P.Am Rev Biochem,1986;55(3):701-732

  30 Almeida ML & Turner MJ,Nature,1983;302(5906):349-352

  31 Walder JA et al.Science,1986;233(4763)569-571

  32 De Langer T et al.Cell,1983;34(3):891-900

  33 Comelissen AWCA et al.Nculeic Acids Res,1986;14(14):5605-5614

  34 Verspieren P et al.Nucleic Acids Res,1990;18(16):4711-4717

  35 Verspieren P et al.Gene,1987;6193):307-315

  36 Miller SI et al.Nucleic Acids Res,1986;14(18):7341-7360

  37 Ramazeilles C et al.Proc Natl Acad Sci uSA,1994;91(17);7859-7863

  38 Chamdhuri G .Biochem Pharmacol,1997;5393):385-391

  39 Brown MS & Goldstein JL.Nature,1990;343(6258):508-509

  40 Rohrer L et al.Nature,1990;343;(3258):570-572

  41 Basu SK.Biochem Pharmacol,1990;40(9):1941-1946

  42 Mukhopadhyay A et al.Science,1989;244(4905):705-707

  43 Hoerauf A et al.Mol Microbiol,1997;24(2):421-429

  44 Ankri S et al.Mol Microbiol,1998;28(4):777-785

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