图2不同酪蛋白浓度情况下LineweaverBurk作图法得出藤黄菌素对重组人CK2全酶抑制作用的动力学(略)
3讨论
蛋白激酶CK2是一种多功能的丝/苏氨酸蛋白激酶，它可能是肿瘤和艾滋病治疗的分子靶点之一，我们通过基因工程方法已获得大量有生物学活性的重组人CK2［4-5］，并进行了一系列生化药理学研究［6］. CK2又是一种多底物的蛋白激酶，迄今已发现其有300多种底物［2］. CK2的许多底物参与信号转导途径. 其中，钙调蛋白，p34cdc2和雌激素受体2，既可受PKC调节，又是CK2的重要底物. 此外，细胞周期依赖性蛋白激酶(CDK), 丝裂原激活的蛋白激酶(MAPK)以及糖原合酶激酶3(GSK3)等多种细胞代谢调节激酶的催化亚基与CK2的α 和α′亚基具有高度的同源性［7］. 这些揭示了某些信号转导、细胞代谢调节的激酶与CK2之间存在密切的相互关系，因此这些激酶的抑制剂均可作为CK2抑制剂的筛选化合物.藤黄菌素是少数几种体外蛋白激酶的抑制剂，它对磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)和蛋白激酶C(PKC)均有明显的抑制作用. 但是目前尚无藤黄菌素作用于蛋白激酶CK2的报道. 5,6二氯1β呋喃糖苯并咪唑(DRB)和N(2氨乙基)5氯萘1硫胺(A3)是已知对CK2有抑制作用的两种化合物［1,8］，对重组人CK2全酶都有较强的抑制作用，其IC50分别为10.4和25.5 μmol/L［6］. 我们观察到藤黄菌素可明显抑制重组人CK2全酶的活性，其IC50为0.86 μmol/L，信捷职称论文写作发表网，且其抑制作用还强于DRB和A3. 虽然CK2既能以ATP也能以GTP作为磷酸供体，但由于其抑制剂多数作用于ATP的结合位点，如CK2的卤代苯并咪唑类抑制剂DRB，它可以通过封闭ATP结合位点中的主要核糖靶定位点，使ATP的核糖环具有较大的流动性，从而抑制CK2的活性［8］，因此我们选用ATP作为磷酸供体测定CK2的活性. 本结果揭示了藤黄菌素对CK2的作用机制，与ATP呈竞争性抑制(Ki=0.19 μmol/L)，而与酪蛋白则呈非竞争性为主的混合型抑制CK2活性(Ki=0.11 μmol/L)；提示藤黄菌素是一种较强的体外蛋白激酶CK2的抑制剂.
【参考文献】
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