2.3移植气管病理学表现A组： 镜下可见吻合口较近部位为假复层纤毛柱状上皮，其余为单层及复层上皮，无纤毛，黏膜下层有大量淋巴细胞浸润，软骨中央部分变性、坏死，周围软骨膜下软骨细胞分裂增殖明显（图1A）. B组： 镜下见移植段气管上皮完整，为假复层纤毛柱状上皮，无脱落，黏膜下层淋巴细胞浸润较少，软骨形态完整，无坏死（图1B）. C组： 第3日死亡的2只小鼠气管上皮较完整，黏膜水肿严重，黏膜下中等量淋巴细胞浸润，软骨开始出现轻度变性，第14日死亡的2只小鼠移植段气管中间软骨坏死，红染，部分软骨形态消失，黏膜下大量淋巴细胞浸润. 其余小鼠移植气管上皮脱落坏死，少许鳞状上皮覆盖吻合口，黏膜下大量淋巴细胞及中性粒细胞浸润. 软骨细胞坏死严重，部分软骨中间部正常结构不能分辨，周围软骨膜下少量软骨细胞分裂增殖（图1C）.
2.4移植后上皮超微结构A组可见纤毛稀疏，中间散在黏液细胞（图2A）；B组见纤毛浓密，几乎全部掩盖黏液细胞（图2B）；C组同A组相似，纤毛短而稀疏，散在黏液细胞（图2C）.
2.5上皮积分B组与A，C组上皮积分比较有统计学意义［（2.872±0.059） vs （1.094±0.120）和（0.995±0.444）， P<0.05）］，而A，C两组则无统计学意义［（1.094±0.120） vs（0.995±0.444）（P>0.05）］. C组数值离散程度大于A组.
2.6软骨破坏程度B组与A组及C组指标（无核软骨细胞/所有软骨细胞）相比有统计学意义［（10.60±1.01）% vs（27.22±1.09）%和（31.40±6.43）%， （P＜0.05）］,A, C组之间则无统计学意义［（27.22±1.09）% vs （31.40±6.43）%，（P>0.05）］. C组数值离散程度大于A组.
图1组织病理学表现 HE×100 略
2.7淋巴细胞计数A, C两组淋巴细胞浸润明显，分别为20.18±1.31个/HPF， 22.55±4.87个/HPF，而B组则很少见淋巴细胞浸润，信捷职称论文写作发表网，≤5个/HPF. A, C两组无统计学意义（P>0.05）. 但C组数值离散程度大于A组.A： C57BL/6（供体） → BALB/c（受体）；B： BALB/c（供体） →BALB/c（受体）；C： KM（供体） →KM（受体）.
图2移植后上皮超微结构×2000 略
3讨论
在大器官移植稳步发展的今天，气管移植的研究及应用却停滞不前，一个重要的原因是缺少一种可靠的遗传背景明确的原位气管移植动物模型. 在国外，Genden等［4-5］于2002年首先建立了近交系小鼠的原位气管移植模型，并在此模型基础上进行了一系列卓有成效的研究，而我国则还没有相关方面的报道.
在参照Genden等［4-5］的方法的基础上，我们应用国内饲养的C57BL/6及BALB/c近交系小鼠分别作为供受体在国内首次建立同种异体气管移植模型，并首次比较近交系小鼠模型同封闭群之间的差别. 试验中我们尝试应用Genden等的方法进行气管移植，但预实验中短期内动物死亡率较高，解剖发现一个关键的原因是由于在原有气管长度的基础上再增加移植了6个气管环，导致气管容易打折，造成动物窒息，因此我们对其进行了改进，将受体移植气管去除2个气管环，然后移植6个气管环的供体气管，这样既保证了吻合口处于无张力状态，又保证了移植气管不易打折，有利于移植气管的存活，实验证实，改进后短期动物全部存活. 实验中近交系移植组存活率均达到100％，而封闭群移植组存活率为60％，于术后第3日及第14日分别有2只小鼠死于呼吸困难. 利用上皮积分、淋巴细胞计数以及无核软骨细胞/所有软骨细胞全面评估移植气管的病理状况：A，B组及C，B组各项指标相比均有统计学意义，表明A，C组均能很好地反映移植排斥及上皮、软骨再生等一系列病理、生理变化. A，C组间各项指标无统计学意义，但是A组各项指标的离散程度同C组相比变异较小，表明A组能够更稳定的进行模型的复制，这可能是由于近交系小鼠个体间差异较小，而封闭群小鼠间则不具有这种基因的稳定性所致［6］. 由此可见近交系小鼠同封闭群相比可应用性更高，能够进行更精确，重复性更好的研究，并且由于近交系小鼠遗传学背景明确，检测方法及手段较多，因此更有利于评价气管移植后各种组织再生、免疫排斥、以及再血管化等病理生理变化.
移植气管的血液供应是气管存活的重要条件，在以往的研究中，人们尝试了多种的解决血供的方法，包括大网膜包绕［7］，肌瓣包绕［8-9］等. 但是在本实验以及Genden等［4-5］的实验中，均没有对小鼠的移植气管做进一步处理，只是在手术中将颈前部肌肉拉拢覆被移植气管，但是小鼠存活情况良好，在解剖小鼠的过程中可见周围覆被的肌肉组织同移植气管紧密相连，有血管长入移植气管. 这种不同于大动物如狗等模型的表现可能是由于动物种属不同，小鼠的组织再生能力较强所致.
本实验我们成功建立了同种异体原位气管移植模型，该方法不需要贵重器材，手术时间短，方法简单易于掌握，移植后动物存活率高，能够很好模拟同种异体原位气管移植后的病理生理变化，并且由于移植动物采用研究较多的近交系小鼠，其遗传背景明确，用于进一步检测的多种抗体已经商品化，有利于进一步研究的展开.
【参考文献】
［1］李小飞， 张涛， 程庆书，等. BMP诱导同种异体气管移植体的软骨再生［J］. 第四军医大学学报,2003,24(21):1960-1962.
［2］ Sung SW, Won T. Effects of basic fibroblast growth factor on early revascularization and epithelia regeneration in rabbit tracheal orthotopic transplantation ［J］. Eur J Cardiothorac Surg, 2001,19(1):14-18.
［3］ Nakanishi R, Umesue M, Hashimoto M, et al. Limit of warm ischemia time befor cryopreservation in rat tracheal isografts ［J］. Ann Thorac Surg, 2000,70(6):1880-1884.
［4］ Genden EM, Iskander A, Bromberg JS, et al. The kinetics and pattern of tracheal allograft reepithelialization［J］. Am J Respir Cell Mol Biol, 2003,28(6):673-681.
［5］Genden EM, Boros P, Liu J, et al. Orthotopic tracheal transplantation in the murine model［J］. Transplantation,2002,73(9):1420-1425.
［6］魏泓. 医学实验动物学［M］. 2版. 成都： 四川科学技术出版社. 2001：34-51.
［7］ Li J, Xu P, Chen H, et al. Improvement of tracheal autograft survival with transplantation into the greater omentum［J］. Ann Thorac Surg,1995,60(6):1592-1596.
［8］李小飞,卢强,程庆书，等. 骨形态发生蛋白复合肌瓣的自体气管的移植［J］. 中华实验外科杂志，2005, 22（3）:373.
［9］Cibantos Filho JS, de Mello Filho FV, Campos AD, et al. Viability of a 12ring complete tracheal segment transferred in the form of a compound flap: An experimental study in dogs［J］. Laryngoscope, 2004,114(11):1949-1952.
