表3肺炎链球菌株毒力基因加入CSP后mRNA表达量(略)
aP<0.05 vs wt菌株; cP<0.05 vs comX-菌株; eP<0.05 vs相应菌株的0 min.
3讨论
我们研究表明,野生菌株在诱导形成感受态发生转化的过程中,五个毒力基因的表达水平与细菌感受态的发生一致,而基因comE和comX缺陷后,菌株不能发生转化,各毒力基因在CSP诱导的各时间段的表达无显著性差异,提示这些毒力基因的表达受到基因comE和comX的调控,这表明细菌的转化对于细菌毒力表达是有帮助的.
基因comX在肺炎链球菌的基因组中有两个拷贝,comX1和comX2,Lee等[4]研究显示两个comX基因只需其中一个就能满足细菌的转化发生,因此我们同时进行了该基因单拷贝缺陷菌株(comX1-和comX2-)的毒力基因表达的研究. 实验结果显示,comX全基因缺陷之后,与基因comE缺陷后一样,菌株的ply基因表达显著下降,而菌株comX1-和comX2-的基因ply表达都较菌株comX-显著升高,而与野生菌株的ply基因表达无显著差异,这表明comX基因对细菌毒力基因ply的影响可能是通过comE这条与转化相关的通路实现的,当基因comX其中一个拷贝被缺陷后,菌株仍可通过comE诱导另一个基因comX拷贝的表达,从而诱导ply基因的表达.
毒力基因的表达分析显示,菌株comX1-的ply, phd和sIgA基因及菌株comX2-的lytA, nanA和sIgA基因都在加入CSP诱导10或20 min后表达有所增加,与细菌形成感受态发生转化的规律一致. 从整体水平上讲comX基因缺陷后菌株的毒力与野生菌株的毒力并没有显著差异,与comE基因缺陷后的效果一样. 这可能是由于comX基因只影响了众多毒力基因中的几个基因的表达,不一定能在整体水平上改变细菌的毒力.
Luo等[7]的研究显示肺炎链球菌的comX仅仅只是细菌转化相关的δ因子,只启动与转化相关的一些基因的表达. 而本研究结果显示comX基因不仅与细菌转化相关,也与细菌毒力的表达相关.
【参考文献】
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