【摘要】 目的：研究慢性乙肝患者（CHB）血清一氧化氮（NO）、透明质酸（HA）、层粘蛋白（LA），IV型胶原（C-IV）血清水平的变化，探讨其在肝纤维化机制中的作用。方法：应用比色法、放免法测定107例CHB、20例健康成人血清NO、HA、LN、C-IV水平。结果：CHB轻、中、重度及肝硬化患者血清NO水平均显著高于对照组（P<0.01），并随着肝损害和肝纤维化程度的加重而升高，血清NO水平与血清HA、LN、C-IV水平呈相关（P<0.01）。结论：NO不仅与肝损伤密切相关，而且与肝纤维化程度相关，NO参与病毒性肝炎及肝纤维化的病理过程，检测NO有助于判断慢性肝病肝纤维化的程度
【关键词】 慢性肝炎乙型 血清NO 肝纤维化
Research the Relation of Hepatic Fibrosis with Serum NO in Patients with Chronic Hepatitis B
Abstract：Objective： To discuss the changes of serum nitric (NO),hyalopasm acid (HA),laminin (LN)and collagen type IV (C-IV) level on hepatic fibrosis mechanism by studying them in patients with chronic hepatitis B (CHB).Method： The concentrations of serum NO, HA, LN,C-IV in 107 patients with CHB and 20 healthy adult were measured by colorimetry and radioimmunoassay. Result： The levels of serum NO in mild CHB group moderate CHB group ,severe CHB group and liver cirrhosis (LC) group were higher significant than that in the control (p<0.01),and change with the degree of hepatic injury and fibrosis ,The level of serum NO was positive correlated with the levels of serum HA ,LN and C-IV(p<0.01). Conclusion： Serum NO is corresponding with not only hepatic injury ,but also with hepatic fibrosis degree ,NO takes ,NO takes part in pathological process of viral hepatitis and hepatic fibrosis Testing the serum NO contributes to evaluating the hepatic fibrosis degree in patients with chronic hepatic disease
Key words: Chronic hepatitis B; Serum NO; Hepatic fibrosis
一氧化氮(NO)作为一种重要的细胞间信息分了,具有多种生物活性。近年来，许多研究表明，NO与肝损伤密切相关。NO 对慢性乙肝肝纤维化的影响也备受关注。本研究通过分析慢性乙肝（CHB）患者血清NO与血清纤维化标志物含量的变化，旨在探讨其变化规律及其在肝纤维化机制中的作用。
1 对象和方法
1．1 研究对象：107例慢性乙型肝炎均为本院肝病区住院患者，其中男90例、女17例，年龄17~66岁，平均38.95岁。临床及病理诊断符合2000年9月西安全国传染病与寄生虫病学术会议修订的诊断标准［1］。临床诊断慢性肝炎轻度（CH-I）22例，中度（CH-Ⅱ）32例，重度（CH-Ⅲ）22例，肝硬化（LC）31例。所有病均无高亚硝酸盐饮食，检查前1周未服用硝酸盐及亚硝酸盐类药物。并以20例健康体检者为对照组。
1.2 方法：清晨空腹采集静脉血。NO检测采用比色法测定，NO试剂盒由美国Cayman公司提供，由肝病实验室专业人员严格按试剂说明书操作；肝纤维化指标透明质酸（HA）、层粘蛋白（LN）、IV型胶原（C-IV）用放射免疫法（RIA），试剂盒由上海海军医学研究所提供。
1.3 统计学处理：实验数据采用±s 表示，组间比较采用t检验，因素相关的相关性采用直线相关分析。
2 结果
血清NO、HA、LN、C-IV 含量临床分型间关系见表1 。NO在慢性乙型肝炎各组中的血清水平显著高于照组（P<0.01）,血清NO随着慢性肝炎轻、中、重度及肝硬化的变化血中含量增加，其NO水平越高，病情越重；同时，NO随着血清肝纤维化程度的加重而升高，NO与HA、LN、C-IV血清水平呈正相关，相关系数分别为0.6654(P<0.01)、0.4479(P<0.01)和0.4693(P<0.01)
3 讨论
内源性一氧化氮是体内的一种必不可少的信息分子,参与机体的多种生理功能,又具有细胞毒作用。其合成部位在血管内皮细胞、肝细胞、Kupffer细胞、Ito细胞、骨骼肌细胞等。NO在肝细胞的损伤机制中扮演着重要角色［2］。现已知慢性肝损伤时白介素、肿瘤坏死因子等多种致炎因子可诱导合成NO，而内毒素是诱导肝硬化患者生产NO的主因素。本研究显示：慢乙肝患者血清NO水平显著高于正常对照组（P<0.01），且随着肝炎轻、中、重、肝硬化的改变，其血清含量明显增高，信捷职称论文写作发表网，NO水平越高，病情越重，提示NO在慢性肝损害中可能起到重要作用。慢性乙型肝炎、肝硬化时致炎因子及内毒素可能通过刺激NO生成而进一步加重肝损害。
表1 血清NO、HA、LN、C-IV含量与临床分型间的关系（略）
与对照组比较，*P<0.05; **P<0.01
肝纤维进NO水平也升高，无论肝纤维化动物模型抑或肝硬化患者，其NO水平均呈现高值，并随病变发展NO的生成量也增加。张弛等［3］在大鼠肝硬化的实验研究中发现，NO水平与肝脏炎症活性的指标HAI以及纤维化程度有明显的动态化并有明显的相关性，尤其是汇管区炎症的程度，这高度提示汇管区浸润的炎症细胞可能是NO的主要来源，而后者参与了肝脏的损伤和修复。肝脏对于慢性损害的反应是纤维化和瘢痕。过去几年来，人们发现肝星状细胞是引起纤维化的主要因素之一［4］。最近，Faillip等［5］的研究报告中提出肝脏损害时，肝星状细胞经历形态和机能的转变，产生大量的纤维和细胞外基质，而NO可通过自分泌和旁分泌来调节肝星状细胞的收缩，其主要是通过与受体结合使cGMP合成增加并发挥第二信使的作用，如降低细胞内游离钙引起的舒张起作用。近年来，对细胞外基质（ECM）与肝纤维化的关系化的关系做了大量研究，发现ECM与肝纤维化的发展关系密切。本研究结果显示NO在慢性乙型肝炎各组中的血清水平显著高于对照组，NO随着慢性肝炎肝损害和血清肝纤维化程度的加重而升高。通过直线相关分析发现，NO水平与HA、LN、C-IV水平呈相关（P<0.01），表明NO不仅与肝损伤密切相关，而且与血清肝纤维化的病理过程，检测NO有助于判断慢性肝病肝纤维化的程度。
【参考文献】
［1］ 中华医学会传染病与寄生虫病学分会、肝脏病学会．病毒性肝炎防治方案［J］．中华肝脏病杂志，2000，8：324-３２9．
［2］ 张明森，王宇明，顾长海，等．一氧化氮介导内毒素所致体外培养肝细胞凋亡［J］．中华传染病杂志，2001，19（1）：19-21．
［3］ 张驰，王吉耀，贺伯明．大鼠肝硬化消退中局部一氧化氮水平的动态变化［J］．中华肝脏病要志，2001，9（2）：122．
［4］ Alam I，Bass NM，Bacchetti P，et al.Hepatic tissue endothelin-l levels in chronic liver disease severity and ascites ［J］．Am Gastroenterol，2000，95（1）：199-203．
［5］ Failli P，Defranco RM ，Caligiuri A，et al .Nitrovasodilatators inhibit platelet-derived growth factor-induced proliferation and migration of activated human hepatic stellate cells［J］． Gastroenterology 2000，119（2）：479-４92．
