浅谈病理制片中固定液的选择
作者:佚名; 更新时间:2014-10-17
[论文关键词]病理;固定液;甲醛;乙醇
[论文摘要]在病理组织诊断中制片过程尤为重要,而在病理制片的过程中组织的固定更为关键,故而对于石蜡切片,组织的固定则是必不可少的重要步骤。在多年的临床经验中,笔者对AF、AAF及甲醛一生理盐水三种混合固定液的优劣进行仔细分析、对比,从而认为混合固定液与其他固定剂固定效果相比之下较为优越。
由于病理学诊断是诊断的金标准,是辅助临床诊断的主要把关口,也是最后的宣判性诊断。做好病理诊断,层层步骤就显得尤为重要,包括组织的取材,固定,脱水,浸蜡,包埋及染色。组织的固定是一个关键的过程,因为没有好的固定就没有好的制片,没有好的制片就不会有好的成品,一张好的切片与固定有着密切的关系。
1 固定的目的
固定的概念是将采取的活体组织置于化学性溶媒(固定液)中,使其不发生自溶与腐败,保持被采取时的形态。
固定的目的是在于尽量使组织和细胞保持与生活时相仿的成分和形态,迅速防止组织、细胞的死后变化,防止自溶与腐败,使细胞内的蛋白质、脂肪、糖、酶等各种成分转变成不溶性物质,使组织中的各种物质沉淀和凝固起来,而产生不同的折射率,信捷职称论文写作发表网,造成光学上的差异,以便染色后易于鉴别和观察。因此,固定的组织愈新鲜愈好,固定组织时,应使用足量的固定液。其固定液的量一般小于组织块总体积的4倍以上。
2 固定液的选择
固定液必需要有较强的渗透能力,能迅速地渗入组织内部,不会使组织过度收缩或膨胀,并且能使组织内易观察的成分可以凝固为不溶性物质,能使组织达到一定的硬度,获得较佳的折光率和对染料具有较强的亲和力。组织细胞中不至于因固定引起人为的改变,因为在凝固原生质以后,增加了细胞对于各种穿透的抵抗力,不至于因以后的处理而使固定后的原生质变形,并尽可能地避免使组织膨胀或收缩,使细胞内的成分(蛋白质)凝固沉淀下来,由正常的半液体状(胶体)变为半固体状(凝胶),增加媒染作用和染色能力,使组织能够得到充分的固定,便于以后的蜡块保存。
固定液的种类很多,分为单纯固定液和混合固定液,其中混合固定液比较常用。
2.1常用单纯固定液
2.1.1甲醛(formaldehyde)为非沉淀性固定剂,是一种约有40%重量溶于水的气体,易挥发,市售的为40%的甲醛水溶液,也称为福尔马林液(formalin)。此液久存自行分解,形成白色沉淀为副醛(三聚甲醛或多聚甲醛)。用于组织固定的浓度为10%,实际浓度含甲醛为4%。其固定液渗透能力很强,固定均匀,对组织收缩小,故而对于免疫组织化学标本的制作常用此液。
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