浅谈病理制片中固定液的选择(2)
作者:佚名; 更新时间:2014-10-17
2.1.2乙醇(alcoh01)即乙醇,为还原剂,无色液体,可与水无限相溶,固定兼脱水,用于固定的浓度为80%-95%。用于糖原、纤维蛋白及弹性纤维的固定,乙醇的渗透力较甲醛弱,能沉淀白蛋白、球蛋白和核蛋白。缺点为渗透能力相对较弱,且易挥发和吸收空气中的水分,故而使用时应盖好容器;并对色素有破坏。
2.1.3醋酸(aceticacid)又名乙酸,为带有刺激气味的无色液体,低于15℃为冰醋酸,可溶于水,能沉淀核蛋白,可较好地保持染色体结构,把未分裂细胞核的染色质沉淀为块状体,从而更清楚地显示细胞核结构。5%的醋酸pH 2-8,可抑制细菌和酶的活性,可防止自溶,缺点为组织膨胀较明显,对于胶原纤维与纤维蛋白尤其明显。一般很少单独使用。
2.2常用混合固定液
2.2.1 AF液(乙醇+甲醛液)配方:95%乙醇或无水乙醇90ml+40%甲醛10ml。此液不但有甲醛的固定作用,并兼有脱水作用,用于固定肥大细胞和糖原,效果较好,米粒大小的胃镜等标本需要4-6h,其余外检的大块组织需用12-24h,其优点是固定后可不经水洗,直接放人95%E,醇继续脱水,大大减少了脱水的过程和缩短了脱水时间,增加了工作效率。
2.2.2 AAF液(醋酸+乙醇+甲醛液)配方:95%E,醇或无水乙醇85 ml+醋酸5 ml+甲醛液10 ml。此液对染色质固定较好,由于醋酸能使组织膨胀,因此可抵偿因乙醇、甲醛等固定液引起的组织收缩和硬化,故常作为混合液而使用。AAF固定液的缺点是组织固定后对细胞膜上的蛋白质和细胞内的某些结构有一定的破坏作用,而对免疫组织化学染色有一定的影响。
2.2.3甲醛-生理盐水配方:甲醛液10 ml+生理盐水90 ml。应用较广泛,pH为7,此液可用于保护脂类和细胞核。送检组织标本在手术切下或活检离体后,细胞结构发生变化,为保持细胞与生活时的形态相似,必需迅速渗入组织来固定原生质。如果当时没有合适的固定液,可以浸泡在生理盐水中保存。此液可保护类脂与细胞核,在酸性染色(如V-G染色)或三重染色之前可做二次固定。
3 小结
由于醇类对低分子蛋白质、多肽及胞质内蛋白质的保存效果较差,解决的方法是与其他试剂混合使用,例如加冰醋酸、乙醇、氯仿、甲醛等。在病理检验中,现在很少单独使用醛类、醇类等作为组织固定液,多数为混合固定液。根据以上比较,证明混合固定液为多种组织及细胞的良好固定液,且优于单独固定液及其他固定剂,根据不同组织的性质及不同的工作状态,在临床的实践工作中可选用适宜的固定液。
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