【关键词】  内脏痛觉

    Suppressive effect of intrathecal administration of diazepam on visceral pain induced by rectal instillation of formalin in rats

　　【Abstract】 AIM:　 To explore whether diazepam has a suppressive effect on visceral pain at the spinal level. METHODS:  By intrathecal drug administration, the effect of diazepam on persistent visceral pain induced by rectal instillation of formalin was studied. RESULTS:  Rectal instillation of formalin induced obvious visceral pain responses, which occurred mainly within 0~75 min after the rectal administration of formalin. Intrathecal pretreatment with three doses of diazepam suppressed the visceral pain responses induced by formalin and the analgesic action of diazepam was mainly within 0~60 min after the rectal administration of formalin. CONCLUSION:  Intrathecal pretreatment with diazepam suppresses the visceral pain induced by rectal instillation of formalin, which suggests that diazepam exerts some suppressive effect on visceral pain at the spinal level.

　　【Keywords】 diazepam; visceral pain; formaldehyde; latency

　　【摘要】 目的： 研究地西泮在脊髓水平对内脏痛有无抑制作用. 方法： 采用鞘内给药的方法观察地西泮对大鼠直肠注入甲醛致持续性内脏痛的抑制作用. 结果： ① 直肠注入甲醛可引起大鼠剧烈的内脏痛反应，疼痛反应主要集中在甲醛刺激大鼠直肠后的75 min内. ② 鞘内预先注入三个剂量的地西泮均可抑制甲醛刺激大鼠直肠诱发的内脏痛，镇痛作用主要集中在甲醛刺激直肠后的0~60 min. 结论： 鞘内注射地西泮可抑制大鼠直肠注入甲醛引起的内脏痛觉，提示地西泮在脊髓水平对内脏痛有抑制作用.

　　【关键词】　地西泮；内脏痛觉；甲醛；潜伏期

　　0引言

　　地西泮（diazepam, valium, 安定）是苯二氮革类的典型代表药物，也是临床上最常用的镇静、催眠及抗焦虑药.以往研究表明，鞘内注入地西泮可抑制躯体痛觉的传入［1］. 但其是否可以作用于脊髓从而抑制内脏痛觉的传入尚无定论.故本实验利用甲醛内脏痛模型，应用鞘内注射地西泮至腰骶膨大的方法探索地西泮在脊髓水平对内脏痛是否有抑制作用.

　　1材料和方法

　　1.1材料

　　雄性Sprague Dawley (SD)大鼠48只，体质量180~220 g（第四军医大学动物实验中心提供），实验前3 d将大鼠置于20~24℃，湿度为50%~60%的环境，保持昼夜节律. 实验时，将大鼠随机分为6组（每组8只）： 直肠对照组： 直肠注入0.5 mL生理盐水；模型组： 直肠注入0.5 mL 20 g/L甲醛；鞘内对照组： 鞘内注入10 μL生理盐水，10 min后直肠注入0.5 mL 20 g/L甲醛；低剂量实验组：鞘内注入10 μL浓度为0.4 g/L的地西泮，10 min后直肠注入0.5 mL 20 g/L甲醛；中剂量实验组： 鞘内注入地西泮的浓度为1.6 g/L，其余同低剂量实验组；高剂量实验组：鞘内注入地西泮浓度为3.0 g/L，其余同低剂量实验组. 地西泮（针剂）购于西安利君制药股份有限公司.实验过程中，保持温度（20~24℃）、湿度（50%~60%）和周围环境安静，避免不必要刺激的影响.本实验操作严格遵守国际疼痛学会(IASP)制定的《关于使用清醒动物进行疼痛研究的纲要》.

　　1.2方法

　　1.2.1鞘内置管术经腹腔注射戊巴比妥钠（40 mg/kg）深度麻醉大鼠后，从C7水平沿背正中线向尾部切开皮肤、皮下组织、肌肉，暴露并去除T4椎板（约1 mm×1 mm），切开硬脊膜，经鞘内向尾部置入内腔充盈7 μL生理盐水的聚乙烯PE8导管（内径0.28 mm，外径0.6 mm，购自日本Natume公司），根据动物大小确定置入导管从入口到腰骶膨大处的长度（大约3～5 cm），经导管注入生理盐水后见硬膜破口处有脑脊液流出证明导管在蛛网膜腔内. 封外口，局部青霉素抗感染.术后单笼饲养3～5 d，观察动物状态良好，无活动障碍，则可进行实验［2］.

　　1.2.2鞘内给药鞘内置管术未引起大鼠运动障碍和毒性反应. 鞘内对照组和三个实验组的大鼠在实验玻璃箱适应30 min后，乙醚麻醉，用10 μL微量注射器（宁波镇海玻璃仪器厂）将10 μL生理盐水或不同浓度地西泮以0.5 μL/s的速度注入预先置好的聚乙烯PE8导管，后用7 μL生理盐水洗脱，信捷职称论文写作发表网，确保地西泮注入到脊髓，封外口. 动物实验完毕后，解剖证实导管内口开口于蛛网膜下腔腰骶膨大处. 局部脊髓无损伤及陈旧性出血，说明本实验结果可靠.

　　1.2.3内脏疼痛的行为学观察将30 cm×30 cm×30 cm的透明有机玻璃箱置于高于实验台45 cm的玻璃台上，实验前30 min将大鼠置于其中使其适应环境，后用乙醚将其麻醉，在肛门周围裸露皮肤涂抹凡士林（避免甲醛接触肛周皮肤引起躯体痛觉），将直径1.5 mm的圆头细管迅速经肛门插入直肠（鞘内对照组和实验组鞘内生理盐水或地西泮处理10 min后进行此操作），按分组要求分别将0.5 mL生理盐水或0.5 mL 20 g/L甲醛溶液注入大鼠直肠. 以5 min为间隔，观察并记录90 min内大鼠的内脏痛相关行为（viseral pain related behaviors, VPRB）的数目［3］［A： 大鼠舔或轻咬腹部、下肢及会阴周围的皮肤；B： 伸展躯体使其拉长；C： 腹部收缩侧屈身体；D： 全身收缩使背部拱起呈弓形，持续时间 (t)<30 s；E： 全身收缩使背部拱起呈弓形，30 s