作者：周春香，张延军，杜永平，徐江平

【关键词】  护心灵；心肌缺血；内皮源性因子；缺血修饰性白蛋白

　　Effects and significance of Chinese medicine Huxinling on endotheliumderived factors and ischemiamodified albumin of experimental cardiac ischemia rats

　　【Abstract】 AIM: To investigate the effects and significance of Chinese medicine Huxingling on ET, TXB2, NO, 6KetoPGF1a and ischemiamodified albumin (IMA) of experimental cardiac ischemia rats after ischemia reperfusion. METHODS:  Forty Wistar rats were divided into 4 groups （n=10 in each group）: sham operation group, sodium chloride group, compound Danshen group and Huxinling group. After 10 d of consecutive intragastric administration, the left main coronary trunk was ligated in all groups except sham operation group to establish experimental cardiac ischemia model to detect and compare the concents of ET, TXB2, NO, 6KetoPGF1a and IMA following reperfusion. RESULTS: The concentrations of ET, TXB2, TXB2/6KetoPGF1a and IMA of sodium chloride group, compound Danshen group and Huxinling group were all significantly higher than those of sham operation group after ischemia/reperfusion. At the same time , NO and 6KetoPGF1a in these 3 groups were significantly lower than those in sham operation group(P<0.05). The concentrations of ET, TXB2, TXB2/6KetoPGF1a and IMA of compound Danshen group and Huxinling group were significantly lower than those of sodium chloride group, but ones of NO and 6KetoPGF1a were higher than those of sodium chloride group(P<0.05, P<0.01). CONCLUSION: Compound Danshen and Huxinling can elevate the concentrations of NO and 6KetoPGF1a in acute cardiac ischemia rats and reduce the levels of ET, TXB2. They have protective effects on ischemic cardiac muscle of rats and Huxinling is more effective than compound Danshen.
 
　　【Keywords】 Huxinling; myocardial  ischemia; endotheliumderived factors;  ischemiamodified albumin

　　【摘要】 目的： 研究中药护心灵对实验性心肌缺血大鼠缺血复灌注后内皮源性因子内皮素（ET），血栓素B2（TXB2），一氧化氮（NO），6酮前列腺素F1a（6KetoPGF1a）及缺血修饰性白蛋白（IMA）的影响及意义. 方法： 40只Wistar大鼠随机分为假手术组、生理盐水组、复方丹参组和护心灵组，每组10只，连续10 d灌胃给药后，结扎除假手术组外大鼠的左冠状动脉主干，建立实验性心肌缺血动物模型，并对大鼠缺血复灌注后的内皮源性因子ET, TXB2, NO, 6KetoPGF1a及IMA的含量进行检测比较. 结果： 实验性心肌缺血大鼠缺血复灌注后生理盐水组、复方丹参组和护心灵组ET, TXB2, TXB2/6KetoPGF1a比值及IMA显著高于假手术组，NO及6KetoPGF1a显著低于假手术组(P<0.05)，复方丹参组和护心灵组与生理盐水组比较则ET, TXB2, TXB2/6KetoPGF1a比值及IMA显著低于生理盐水组，NO及6KetoPGF1a呈显著高于生理盐水组（P<0.05,  P<0.01）. 结论： 复方丹参和护心灵均能显著提高急性缺血大鼠内皮源性因子NO及6KetoPGF1a水平，降低ET, TXB2水平，对大鼠缺血心肌均具有保护作用，其中以护心灵效果更为显著.
 
　　【关键词】  护心灵；心肌缺血；内皮源性因子；缺血修饰性白蛋白

　　0引言

　　当心肌缺血发生后，心肌细胞也同时发生着缺血性损伤，但心肌细胞的损伤是一个逐渐进行的动态过程［1］，在缺血30 min以后即使血流恢复，受损心肌细胞的结构和功能也不可能再得到完全的恢复［2］，当心肌细胞发展为不可逆性的损伤时，即使恢复血液再灌注也并不能使这种损伤减轻，甚至会加速受损心肌细胞的损伤、甚至导致心肌细胞死亡［3］，因此加强心肌缺血再灌注后心肌的保护对于缺血性心脏功能的保护就显得特别重要. 护心灵是中草药复方制剂. 其主要成分由隔山香、毛麝香［4］等组成. 为了解护心灵对缺血性心脏病的治疗作用，我们就护心灵对实验性心肌缺血大鼠内皮源性因子及IMA的影响进行了研究.

　　1材料和方法

　　1.1材料40只清洁Wistar雄性大鼠(196±14) g，由第四军医大学动物实验中心提供，随机分为假手术组、生理盐水组、复方丹参组和护心灵组，每组10只. 复方丹参片由上海海虹实业（集团）巢湖中辰药业有限公司生产，批准文号：国药准字Z34020693；HXL由南方医科大学药理教研室研制，由三七、川芎、麝香、冰片四味药组成，经检测质量控制在有效活性部位含量大于50%(批号： 20030715)；乌拉坦由曹阳中学化工厂生产（批号： 990418）,用时以灭菌注射用水配制成20%注射液. ET, NO, TXB2, 6KetoPGF1a，购自北京华英生物制品研究所，IMA试剂盒购自北京邦定泰克生物技术有限公司，SN697型双探头γ计数器购自上海原子核研究所日环仪器一厂；7510型全自动生化分析仪购自日本日立公司.
 
　　1.2方法复方丹参组按0.68 g/kg剂量给药，护心灵组按200 mg/kg给药、用温生理盐水配成体积分数为50%的混悬液. 假手术组和生理盐水组均给予等容量的温生理盐水，1次/d，连续10 d，均采取灌胃给药. 末次给药后1 h，用20%乌拉坦5 mL/kg腹腔浅麻醉大鼠，背位固定，颈动脉插管连接多导生理记录仪，用橡皮球套住大鼠头部，连接人工呼吸机进行人工呼吸. 胸部去毛、常规消毒，沿左锁骨中线纵行切开皮肤约2 cm，于心尖明显搏动处拉开胸廓，小心暴露心脏，剪开心包，轻压右侧胸廓，微微挤出心脏，于左心耳根部与肺动脉圆椎间结扎左冠状动脉，假手术组只在结扎部位穿线，不结扎. 缺血45 min后恢复冠脉血流120 min结束实验，迅速心脏采血3 mL，置于100 g/L EDTA・2Na2  30 μL和抑肽酶40 μL试管中混匀，在4℃下4000 r/min离心20 min，取血浆分装后，置于-70℃冰箱保存备检测. ET, NO, TXB2, 6KetoPGF1a放射免疫检测采用上海原子核研究所日环仪器一厂生产的SN697型双探头γ计数器检测；IMA的检测采用日立7510型全自动生化分析仪进行检测，操作过程严格按照试剂盒提供说明书进行.
 
　　统计学处理： 所有数据采用SPSS10.0软件包进行统计学处理，计量指标数据用x±s表示，组间比较采用方差分析，两两比较采用SNKq检验. P<0.05为具有统计学差异.

　　2结果

　　实验性心肌缺血大鼠缺血复灌注后生理盐水组、复方丹参组和护心灵组ET, TXB2, TXB2/6KetoPGF1a比值及IMA显著高于假手术组，NO及6KetoPGF1a显著低于假手术组(护心灵组，P<0.05；复方丹参组，P<0.01；生理盐水组，P<0.001)；复方丹参组和护心灵组与生理盐水组比较ET, TXB2, TXB2/6KetoPGF1a比值及IMA显著低于生理盐水组，NO及6KetoPGF1a呈显著高于生理盐水组(复方丹参组，P<0.05；护心灵组，P<0.01). 各组大鼠缺血复灌注后ET, NO, TXB2, 6KetoPGF1a, TXB2/6KetoPGF1a比值及IMA的含量有一定变化（表1）.
 
　　表1大鼠缺血复灌注后ET, NO, TXB2, 6KetoPGF1a, TXB2/6KetoPGF1a及IMA变化情况（略）

　　aP<0.05, bP<0.01 vs假手术.

　　3讨论

　　血浆ET, NO, TXA2和PGI2是一组由血管内皮细胞合成并分泌的血管活性物质，对冠状血管的舒缩有着重要的调节作用，ET和NO, TXA2和PGI2是两对相互对抗的血管舒缩因子［5-6］，他们通过协同或对抗作用来舒张或收缩血管，以维护冠状血管的正常状态. 其中TXA2和PGI2性质