脉冲电磁场对大鼠骨髓间充质干细胞增殖及成骨分化的影响(2)
作者:佚名; 更新时间:2014-12-13
结果显示T5组可以显著提高rMSCs增殖水平,提示该刺激参数可能是PEMFs刺激MSCs生长与增殖的一个“窗口”. 本实验中,PEMFs作用3 d后,T1,T2,T4组均未能表现出提高细胞增殖水平的作用,但在作用5 d后,各组细胞增殖水平均有提高,说明对于不同的频率和场强,细胞需要不同的刺激时间,才可以对PEMFs产生有效的反应. 倒置相差显微镜下观察到经PEMFs作用的rMSCs体积明显较对照组大,细胞增殖能力旺盛,传代周期明显缩短,培养2~3 d即可进行传代处理.
 
  PEMFs作用促进成骨细胞增殖、分化,加速了体外骨形成[8]. ALP是成骨细胞的早期标志酶,可标志成骨分化的开始. 有研究发现,MSCs向成骨细胞分化的过程中,ALP水平有时间依赖性,随着诱导时间的延长表达量增加[9]. 本实验结果显示,经过5 d的刺激, rMSCs中可检测到ALP的表达,并随时间延长,表达水平逐渐增高,说明rMSCs向成骨细胞分化,并开始分泌骨基质. PEMFs刺激18 d,四环素荧光标记可观察到相当数量和面积的特征性金黄色,进一步证实rMSCs向成骨细胞分化,并促进了成骨细胞的体外骨形成. 继续刺激,可肉眼观察到圆形或卵圆形的矿化小结,经茜素红染色为阳性,对照组也出现弱阳性反应. 可能的原因是由于培养液或血清的诱导,也可能是由于体外获取的原代细胞含有少量成骨细胞,rMSCs的分离方法还需要进一步改进.

  PEMFs有促进rMSCs增殖和成骨分化两方面的作用,是PEMFs有效治疗骨折、骨质疏松等骨科疾病的可能机制之一. 但是将PEMFs用于促进rMSCs增殖以获得大量组织工程种子细胞的时候,需要找到更好的磁场参数和培养条件,控制rMSCs的分化,这些都有待今后进一步深入探讨.

 

参考文献
    [1]Sudeepta A, Pittenger MF. Human mesenchymal stem cells modulate allogeneic immune cell responses [J]. Blood, 2005, 105(4): 1815-1822.

  [2]庞永刚, 崔彭城, 陈文弦, 等. 人骨髓间质干细胞作为骨、软骨组织工程种子细胞的实验研究[J]. 细胞与分子免疫学杂志, 2004, 20(3): 306-309.

  [3]曹丰,贾国良,牛丽丽,等.移植时机对骨髓间充质干细胞修复梗死心肌的影响[J]. 第四军医大学学报,2005,26(1):22-27.

  [4]罗二平,焦李成,申广浩,等. 不同强度脉冲电磁场对兔股骨骨密度及生物力学特性的影响[J]. 生物医学工程学杂志,2005,22(6):1168-1170.

  [5]Simmons JW Jr, Mooney V, Thacker I. Pseudarthrosis after lumbar spine fusion: Nonoperative salvage with pulsed electromagnetic fields[J]. Am J Orthop,2004, 33(1): 27-30.

  [6]赵敏,许建中,周强,等. 脉冲电磁场促进人骨髓间充质干细胞成骨的研究[J].中国矫形外科杂志, 2004,12(6):439-443.

  [7]张小云,张宇. 恒定磁场对骨组织中细胞影响的研究[J]. 中国骨质疏松杂志,2006, 12(4):333-337.

  [8]李丽荣,罗二平,申广浩,等.低强度脉冲电磁场对大鼠成骨细胞的影响[J]. 第四军医大学学报,2005,26(6):571-573.

  [9]Sammons J, Ahmed N, El?Sheemy M,et al. The role of BMP?6, IL?6, and BMP?4 in mesenchymal stem cell?dependent bone development: Effects on osteoblastic differentiation induced by parathyroid hormone and vitamin D3[J]. Stem Cells Dev, 2004, 13(3): 273-280.

核心期刊快速发表
Copyright@2000-2030 论文期刊网 Corporation All Rights Reserved.
《中华人民共和国信息产业部》备案号:ICP备07016076号;《公安部》备案号:33010402003207
本网站专业、正规提供职称论文发表和写作指导服务,并收录了海量免费论文和数百个经国家新闻出版总署审批过的具有国内统一CN刊号与国际标准ISSN刊号的合作期刊,供诸位正确选择和阅读参考,免费论文版权归原作者所有,谨防侵权。联系邮箱:256081@163.com