针刺对抑郁症模型大鼠海马区单胺类神经递质的影响(2)
作者:佚名; 更新时间:2014-12-13
5mmol/L EDTA)以及内标溶液(DHBA0.006mg/ml)20μl,冰浴中匀浆,4℃高速离心(10000r/min),取上清液注入HPLC-EC检测系统测定单胺类神经递质及其主要代谢产物的含量,进样量为20μl。用内标法定量,峰面积计算含量。共检测出2种单胺类神经递质,其洗脱顺序依次为:(1)去甲肾上腺素(NE);(2) 5-羟色胺(5-HT)。

  1.5   统计学方法      

  以均数加减标准误(x±s)表示,统计分析用SPSS12.0统计软件处理。

  2  结果与分析

  2.1  各组大鼠Open-Field法行为学测定结果      

  Open-Field法是测定抑郁症大鼠行为学的经典方法,分水平运动和垂直运动两个观察面,以观察得分为评分计算单位。各组大鼠的水平运动评分见表1,垂直运动评分见表2。表1   各组大鼠Open-Field法行为测定水平运动评分结果(略) 注:与正常对照组比,▲P<0.05,▲▲P<0.01;与模型对照组比,*P<0.05,**P<0.01表2   各组大鼠Open-Field法行为测定垂直运动评分结果(略) 注:与正常对照组比,▲P<0.05,▲▲P<0.01;与模型对照组比,*P<0.05,**P<0.01

      结果表明:(1)在造模结束时(实验第21天),与正常对照组比较,模型对照组以及各治疗组大鼠的水平和垂直运动明显降低(P<0.01);模型对照组与各治疗组大鼠的水平活动和垂直运动差异无显著性。(2)在治疗第7天(实验第28天)后,针刺组大鼠的行为学评分明显升高,与正常对照组已经无明显差异(P>0.05);药物治疗组与正常组大鼠行为学评分相比,尚存在明显差异(P<0.01),与模型组行为学评分差异无显著性(P>0.05)。(3)在治疗21天(实验第42天)后,针刺组和药物治疗组行为学评分与正常组大鼠已经差异无显著性(P>0.05);与模型对照组比较,水平运动和垂直运动差异有显著性(P<0.01)。(4)在治疗21天后,针刺治疗组大鼠与氟西汀药物治疗组大鼠的行为学评分差异无显著性。

  2.2   各组大鼠海马区单胺类神经递质的测定结果  

  应用高效液相电化学方法测定各组大鼠海马区内单胺类神经递质及其代谢产物的含量。我们在实验第42天,处死大鼠去大脑海马组织进行高效液相电化学检测,仅检测到海马区内5-HT和去甲肾上腺素的含量;5-HT的代谢产物5-HIAA和NE的代谢产物MHPG以及DA和它的代谢产物DOPAC,均没有检测到。5-HT和NE的含量见表3。表3   各组大鼠海马区单胺类神经递质的测定结果(略)注:与正常对照组比较,▲P<0.05,▲▲P<0.01;与模型对照组比较,*P<0.05,**P<0.01

  结果表明:(1)与正常对照组相比,模型对照组大鼠海马5-HT和NE降低(P<0.01)。(2)经过21天治疗,与模型对照组相比,药物氟西汀治疗组和针刺治疗组大鼠海马内5-HT和NE含量明显升高(P<0.05,P<0.01);与正常对照组差异无显著性(P>0.05)。(3)各组大鼠海马区内5-HT和NE的比值,差异无显著性(P>0.05)。

  3  讨论

  关于抑郁症的病因和发病机制尚不确切。一般认为,本病的发生除了与心理-社会因素和遗传因素有关外,主要还由于患者脑内单胺类神经递质减少、相应受体的敏感性改变以及递质系统间失衡等因素有关。许多研究报告发现,抑郁症患者存在生物胺水平和(或)生物胺神经通路功能乃至结构的异常,而NE和5-HT被认为与情感障碍的发生关系最为密切;另一方面,NE和(或)5-HT再摄取抑制剂至今仍然是抗抑郁药的主体。其中,氟西汀是第一个选择性5-羟色胺再摄取抑制剂(SSRIs),也是至今应用最广的抗抑郁药。研究资料表明[6]氟西汀有抑制神经元从突触间隙摄取5-HT、增加间隙中可供实际利用的5-HT,从而改善5-HT能神经元的功能状态而改善情感症状;同时,可以通过5-HT和NE能神经元之间的交互作用,影响和调节NE神经元功能、增加突触间隙NE含量而发挥抗抑郁作用。而另一方面,大脑内不同区域的功能存在差异,其中海马是边缘系统的重要组成部分,和情绪及动机的产生以及和脑的高级神经活动——学习记忆有关。海马还与额叶皮质、皮层下杏仁复合体、纹状核及下丘脑后部等有复杂的纤维联系;也是Papez情绪动机回路的一个重要环节[7]。应用核磁共振技术发现,与正常人相比,正在患抑郁症的患者左、右两个海马区的体积明显减小,直接提示了抑郁症与海马区的关系[8]。

  针灸对抑郁症的治疗有确切的疗效。从我们的实验结果来看,针刺治疗可以显著地改善抑郁症模型大鼠的行为学异常,治疗21天时达到正常组大鼠的水平(P>0.05),与氟西汀治疗相当(P>0.05),而与模型对照组的水平运动和垂直运动评分存在明显的差异(P<0.01)。但是从治疗过程来分析,针刺组大鼠的行为学评分首先得到改善,而且在治疗的第1周就已经与正常组大鼠差异无显著性。显现了针刺治疗抑郁症存在某种独特的机制,提示针刺治疗与药物(氟西汀)治疗在机制上可能存在明显的差异,针刺治疗有起效快的特点。本研究还提示,在深入探索针刺治疗抑郁症的神经生物学机制时,可能需要考虑观察的时间窗等因素,尤其是在治疗的早期和超早期。

  我们的研究发现抑郁症模型大鼠海马区NE和5-HT含量降低,而通过21天治疗后,针刺组和氟西汀组海马区NE和5-HT的含量都升高,与模型对照组存在明显差异(P<0.05,信捷职称论文写作发表网,P<0.01),而与正常对照组差异无显著性(P>0.05),提示了针刺抗抑郁的作用与海马区、尤其是海马区NE和5-HT神经元功能改善有关。但是进一步的研究,还需要考虑海马区5-HT和NE等单胺类神经递质的动态变化规律,以及递质对应的受体功能和结构改变、受体之间交互作用等变化。

  【参考文献】

  1 Willner P, Towell A, Sampson D, et al. Reduction of sucrose preference by chronic unpredictable mild stress and its restoration by a tricyclic antidepressant. Psychopharmacology, 1987,93(3):358-364.

  2 李忠仁.实验针灸学.北京:中国中医药出版社,2003,360.

  3 Katz RJ, Roth KA, Carroll BJ. Acute and chronic stress effects on open field activity in the rat:implications for a model of depression.Neuroscience Biobehavioral Reviews, 1981, 5:247-251.

  4 袁淑兰,阮金秀,杨晓敏. 双柱双泵高效液相色谱电化学检测器测定大鼠脑中生物胺及其代谢产物. 中国药理学与毒理学杂志,1990,4(1):4-7.

  5 Glowinski J, Iversen LL. Regional studies of catecholamines in the rat brain:1.the disposition of [3H] norepinephrine, [3H] dopamin and [3H] dopa in various regions of the brain. J Neurochem,1966,13:655.

  6 Wong DT, Bymaster FP, Engleman EA . Prozac (fluoxetine, Lilly 110140), the first selective serotonin reuptake inhibitor and an antidepressant drug: twenty years since its first publication. Life Science,1995, 57: 411-441.

  7 Joseph R. Enviromental influences on neural plasticity, the limbic system, emotional development and attachment:a review.Child-Psychiatry-Hum-dev.1999,29:189-208.

  8 杜占文.解读抑郁症.国外科技动态,2000,10(375):14-15.

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