胞水平同时检测CD4，CD25和FOXP3的表达变化，发现CD25和FOXP3的表达具有一定的相关性. 新鲜分离的CD4+CD25+T细胞中59.8%表达FOXP3，而CD25hiT细胞中为86.3%，但是，如果以CD4+CD25+FOXP3+T细胞作为调节性T细胞的金标记，CD25hiT细胞只占调节性T细胞总数的56.5%，CD4+CD25+T细胞中非调节性T细胞占40.2%. 淋巴细胞在自身肠道菌群抗原刺激后，CD4+CD25+及CD4+CD25hi T细胞中FOXP3的表达均下降，这说明抗原刺激后CD25与FOXP3表达的相关性下降. 因此，CD25及CD25hi均不能很可靠地标记人类的调节性T细胞，尤其是在淋巴细胞受到抗原刺激以后. 我们选择混合培养14 d计数细胞并作流式细胞检测. 抗原刺激后，淋巴细胞的数量比不加抗原孔增加约21.0%，这说明部分淋巴细胞被活化增殖，但反应并不强烈. 在所有研究对象中，CD4+CD25+或CD4+CD25hiT细胞中FOXP3的表达均呈下降趋势，这提示肠道菌群抗原作为外来抗原刺激自身的淋巴细胞后，活化增殖的细胞中主要是CD4+CD25+FOXP3-反应性T细胞，而不是CD4+CD25+FOXP3+调节性T细胞.

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